African swine fever pcr detection instrument using steps

非洲豬瘟pcr檢測(cè)儀器使用步驟

樣品采集及運(yùn)輸

樣品采集及運(yùn)輸按照NY/T541的規(guī)定執(zhí)行，采集豬的脾臟、淋巴結(jié)、血液等組織材料或血粉用于檢測(cè)，樣品應(yīng)在冷藏條件下盡快運(yùn)輸至實(shí)驗(yàn)室，避免反復(fù)凍融。采樣時(shí)應(yīng)穿戴個(gè)人生物安全防護(hù)裝備，實(shí)施現(xiàn)場(chǎng)消毒和廢棄物處理。

樣品處理

檢測(cè)前樣品應(yīng)在*中處理。取0.1g～0.2g組織或血粉，經(jīng)研磨破碎后加1mL的0.01mol/L PBS（pH7.2）制成勻漿，經(jīng)12 000 r/min離心2Min取上清；全血、血清樣品直接取1mL，置于1.5 mL離心管內(nèi)蓋緊管帽。將上述處理的樣品置于60℃條件下滅活30min。

樣品保存

采集或處理好的樣品在2℃～8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)24 h；如需保存，應(yīng)放置-70℃冰箱，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（凍融不超過(guò)3次）。

病毒DNA提取

DNA提取應(yīng)在樣本制備區(qū)內(nèi)采用以下方法進(jìn)行，若使用其他等效的病毒DNA提取試劑，則按照試劑說(shuō)明書(shū)操作。

待檢樣品、陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照的份數(shù)總和用n表示，取n個(gè)滅菌1.5 mL離心管，逐管編號(hào)。

每管加入200μL DNA提取液1，然后分別加入待測(cè)樣品、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照各200μL，1份樣品換用1個(gè)吸頭，混勻器上震蕩混勻5s。于4℃～25℃條件下，13 000 r/min離心10 min。DNA提取液1見(jiàn)附錄A。

盡可能吸取上清、棄去，吸頭不要碰到沉淀，再加入10μL DNA提取液2，混勻器上震蕩混勻5 s。于4℃～25℃條件下，2 000 r/min離心10s。DNA提取液2見(jiàn)附錄A。

100℃干浴或沸水浴10 min。

加入90μL無(wú)DNA酶的滅菌去離子水，13 000 r/min離心10 min，上清即為提取的DNA，-20℃保存?zhèn)溆谩o(wú)DNA酶的滅菌去離子水見(jiàn)附錄A。

非洲豬瘟pcr檢測(cè)儀器使用步驟

　　儀器特點(diǎn)

　　1.體積小，重量輕，易于攜帶。輕松滿足外出實(shí)驗(yàn)的需求。

　　2.內(nèi)置10寸高清電容屏PDA，觸屏操作，簡(jiǎn)便快捷。

　　3.Marlow高品質(zhì)Peltier制冷片，結(jié)合德國(guó)PT1000溫度傳感器以及電性電阻加熱補(bǔ)償邊緣的溫度控制模式，大升溫速度7℃，大降溫速度5℃，大大縮短實(shí)驗(yàn)時(shí)間。

　　4.整板3s快速采光模式，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果孔位一致性。

　　5.簡(jiǎn)潔直觀的軟件引導(dǎo)，輕松開(kāi)啟檢測(cè)實(shí)驗(yàn)。

　　非洲豬瘟PCR檢測(cè)儀應(yīng)用領(lǐng)域

　　□ 基礎(chǔ)科學(xué)研究

　　□ 病原體檢測(cè)

　　□ 肉制品摻假

　　□ 轉(zhuǎn)基因檢測(cè)

　　□ 食品安全檢測(cè)

　　□ 藥物開(kāi)發(fā)及合理用藥

　　□ 基因表達(dá)

　　□ 水體監(jiān)測(cè)

　　技術(shù)參數(shù)

　　樣品容量：16x0.2ml、支持8聯(lián)管

　　適用耗材：常見(jiàn)透明PCR 耗材，8x0.2ml 排管，0.2ml 單管

　　反應(yīng)體系：5-120ul反應(yīng)模式體系

　　加熱/制冷模塊：進(jìn)口半導(dǎo)體熱電模塊

　　溫度控制范圍：4°C-99℃

　　升降溫平均速率≥2°C/秒

　　溫控精度：≤±0.1°C

　　溫度均勻性：≤± 0.2°C

　　溫控區(qū)域數(shù)量：多點(diǎn)(2 點(diǎn))

　　梯度數(shù)：0 個(gè)

　　梯度溫度范圍：無(wú)

　　梯度孔數(shù)：無(wú)

　　激發(fā)光源：免維護(hù)led

　　激發(fā)光波長(zhǎng)范圍：400-700nm

　　檢測(cè)部件：進(jìn)口光電檢測(cè)器

　　檢測(cè)通道數(shù)：標(biāo)配 1通道(FAM)、高配(選配)(FAM、VIC)

　　適用染料和探針：FAM/SYBR Green I, VIC/HEX/CY3(選配), ROX/Texas Red(選配), Cy5,TAMARA(選配)

　　軟件功能：熒光定量 PCR 系統(tǒng)軟件;

　　實(shí)時(shí)擴(kuò)增反應(yīng)曲線功能;

　　特定標(biāo)本實(shí)時(shí)反應(yīng)曲線顯示;

　　數(shù)據(jù)分析功能;

　　陰陽(yáng)結(jié)果自動(dòng)判定功能;

　　圖形化顯示功能。